1658025垂直電泳是實(shí)現(xiàn)電泳分析的儀器。一般由電源、電泳槽、檢測單元等組成。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運(yùn)動(dòng),不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運(yùn)動(dòng)速度不同,據(jù)此可以對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組分分析或單個(gè)組分提取制備。
1658025垂直電泳的工作原理:
在溶液中能吸附帶電質(zhì)點(diǎn)或本身帶有可解離基團(tuán)的物質(zhì)顆粒,如蛋白質(zhì)、氨基酸等,在一定的pH值條件下,于直流電場中必然會(huì)受到電性相反的電極吸引而發(fā)生移動(dòng)。不同物質(zhì)的顆粒在電場中的移動(dòng)速度除與其帶電狀態(tài)和電場強(qiáng)度有關(guān)外,還與顆粒的大小、形狀和介質(zhì)黏度有關(guān)。根據(jù)這一特征,應(yīng)用電泳法便可以對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組分分析或單個(gè)組分提取制備,電泳儀正是基于上述原理設(shè)計(jì)制造的。
電泳的影響因素很多,主要有被分離物質(zhì)的帶電荷量多少、電場強(qiáng)度、緩沖液的pH值和離子強(qiáng)度及支持介質(zhì)的化學(xué)惰性。
1、清洗部件,部件組裝前要*清洗干凈。
2、組裝電泳槽。
3、灌膠:先灌分離膠,待凝固后再灌濃縮膠。灌膠前接通冷卻水,夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管。
4、加樣:松開夾子,放掉槽內(nèi)的蒸餾水,待水流完后,再夾緊夾子。雙手輕輕取出樣品梳將孔中水分吸去。在上下貯液槽中加入緩沖液,液體高度應(yīng)超過上貯液槽短玻璃板的上緣。用注射器吸取一定量的樣品加到凹型樣品空內(nèi)。
5、電泳:上貯液槽導(dǎo)線與電泳儀的負(fù)極相連,下貯液槽導(dǎo)線與電泳儀的正極相連。
6、取出膠板:電泳結(jié)束,旋送螺母,取出膠框,剝出玻璃板。
7、關(guān)閉電源。
1658025垂直電泳的使用注意事項(xiàng):
1、垂直電泳儀通電后,不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。
2、電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應(yīng)先斷電,以免觸電。同時(shí)要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
3、由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,電泳時(shí)所通過的電流量也不同,其泳動(dòng)速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。
4、在總電流不超過儀器額定電流時(shí),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5、某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時(shí),允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機(jī),但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開機(jī),否則電壓表指針將大幅度跳動(dòng),容易造成不必要的人為機(jī)器損壞。
6、使用過程中發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,以免發(fā)生意外事故。