7500定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。7500將PCR熱循環(huán)，熒光檢測和各種應(yīng)用分析軟件結(jié)合在一起，可以動態(tài)觀察PCR每一循環(huán)各反應(yīng)管中PCR擴(kuò)增產(chǎn)物逐漸增加的情況。PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)束后可以馬上得到定量結(jié)果，無需凝膠電泳分析，無需純化PCR產(chǎn)物，無需進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)操作。7500型實(shí)時熒光定量PCR儀采用96孔反應(yīng)板或單個及8聯(lián)管，反應(yīng)體積25-100微升，實(shí)驗(yàn)可以在不到2小時內(nèi)結(jié)束。與其他人工基因定量分析方法如Northern blotting or RNase-protection assays相比，7500型實(shí)時熒光定量PCR系統(tǒng)具有時間省，靈敏度高，準(zhǔn)確性好和線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)。
 

　　7500定量PCR儀技術(shù)原理：

　　是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基因，利用熒光信號累積實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。在7500定量PCR儀技術(shù)的發(fā)展過程中，兩個重要的發(fā)現(xiàn)起著關(guān)鍵的作用：

　　在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發(fā)現(xiàn)，它能降解特異性熒光記探針，因此使得間接的檢測PCR產(chǎn)物成為可能。

　　第二此后熒光雙標(biāo)記探針的運(yùn)用使在一密閉的反應(yīng)管中能實(shí)時地監(jiān)測反應(yīng)全過程。這兩個發(fā)現(xiàn)的結(jié)合以及相應(yīng)的儀器和試劑的商品化發(fā)展導(dǎo)致7500定量PCR儀方法在研究工作中的運(yùn)用。

　　7500定量PCR儀系統(tǒng)的特色：

　　1、擴(kuò)增反應(yīng)曲線的實(shí)時監(jiān)測。

　　2、采用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行靶基因的定量。

　　3、光源使用時間監(jiān)測及儀器系統(tǒng)自我診斷程序。

　　4、反應(yīng)板設(shè)置指南，使實(shí)驗(yàn)設(shè)計非常簡單，即使是復(fù)雜的多重定量實(shí)驗(yàn)也是如此。

　　5、自動設(shè)定熒光基線，自動計算熒光閾值使實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析大大簡化。

　　6、自動SNP分型軟件以直觀的圖表輸出分型結(jié)果并自動進(jìn)行分型質(zhì)量評分。

　　7、解離曲線數(shù)據(jù)采集操作簡單觀察方便，可以在儀器運(yùn)行時觀察解離曲線數(shù)據(jù)。

　　8、觀察實(shí)時擴(kuò)增曲線時可以非常方便的標(biāo)定所對應(yīng)的樣品孔位置。

　　9、基因表達(dá)相對定量軟件提供強(qiáng)大的結(jié)果分析顯示，可以自動將多達(dá)10塊96孔板基因表達(dá)實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)同時分析，并自動去除無關(guān)項(xiàng)數(shù)據(jù)，該軟件為選購件。